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Olink蛋白质组学
Olink 采用具有独立知识产权的 PEA（Proximity Extension Assay，邻位延伸分析技术），将带有特有核苷酸序列探针的一对抗体与被检测蛋白质特异性结合，正确且邻位探针通过末端 5 bp 配对碱基互补结合，在延伸酶的作用下形成双链模板，利用 qPCR 或 NGS 进行检测，通过特异性的核苷酸序列信号来反应所检测蛋白质的含量。
目前 Olink 有两大系列产品，利用 qPCR 定量的 Target 系列和利用 NGS 定量的 Explore 系列。Target 系列有 Target 48 和 Target 96；Explore 有 Explore 384、1,536、 3,072 和 Explore HT。
产品优势
- 低起始量、高通量：1~6 µl 体液中一次性精确检测 48~5,000+ 种生物标志物；
- 高灵敏度、高特异性：独特的 PEA 技术，可检测 fg/ml 级别蛋白，识别相似度90%的同源蛋白；
- 严谨的质控体系：设置内部和外部对照，严格控制检测准确性；
- 广泛的样品类型：除常规血清、血浆外，还可进行脑脊液、细胞培养液、组织裂解液等各种样品类型的检测。
产品应用
- 临床疾病研究：疾病机制、疾病分级、疾病诊断和预后分子标志物等；
- 药物研究：药物靶点、药物作用机制等；
- 工业类客户研究：助力新药研发、新诊断产品开发等。
技术路线
Olink蛋白组学助力进行性纤维化性间质性肺病预测标志物筛选
Proteomic biomarkers of progressive fibrosing interstitial lung disease: a multicentre cohort analysis. The Lancet Respiratory medicine. 2022
研究背景：
间质性肺疾病（Intersitial Lung Diseases, ILD）是涵盖200多种疾病的罕见病，可导致肺纤维化，肺组织不可逆的疤痕会对肺功能产生负面影响。有18~32％的ILD患者会出现肺纤维化持续恶化的问题，称为纤维化性质性疾病(Fibrosing Interstitial Lung Diseases, FILD)。但是在临床研究中，进行性纤维化性质性疾病(Progressive Fibrosing Interstitial Lung diseases, PFILD)的判断标准各不相同，在处理上也存在很多不确定性。
研究方案及主要结果：
研究使用Olink Explore Inflammation 384靶向蛋白质组学Panel进行了多中心队列研究，包括加州大学收集的发现队列384例结缔组织疾病相关ILD、慢性过敏肺炎、或不可分类ILD患者的血浆样本在和德克萨斯大学收集的验证队列204例患者的血浆样本。同时借助机器学习算法（Machine Learning），结合Olink定量蛋白质组技术，最终发现了能够预测进行性间质性肺纤维化进展的蛋白质组特征（Proteomic Signature），该蛋白质组特征为17个基于Olink PEA技术的蛋白标志物组合，显示了基于蛋白质组的血浆和血清生物标志物在预测ILD患者进展风险方面的巨大潜力。
提供蛋白质NPX相对定量数据及质控结果。
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产品类型 |
采集管 |
分离方法 |
存储 |
运输 |
送样要求 |
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血浆 |
抗凝剂处理的采集管（EDTA、柠檬酸或肝素） |
1000~2000g， 4℃离心10min |
-80℃ |
干冰 |
≥40
微升/样品 建议体积 96孔板：50 微升/样品 Eppendorf试管：100~500微升/样品 （耐低温、防漏液） |
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血清 |
血清采集管 |
室温凝固15~30min（过长会溶血）， 1000~2000g，4℃离心10min |
Q1：Olink蛋白质组学产品可检测的样品类型？
A1：血清和血浆是最标准可接收的样品类型。其他样品类型需评估。
Q2：Olink蛋白质组学产品可以对分批次检测的样品进行比较么？
A2：建议客户提前规划好整体项目设计，在不同批次间设置搭桥样品8~10例，以便进行批次间样品的比较。
